干货 |生物制品内外源病毒因子检测的指导原则

ICH Q5A（R1）及USP-NF<1050>中对不同级别细胞进行病毒检测的建议：

中国药典三部（2020版）对细胞基质及细胞库体系的病毒检查的建议：

虽然在细胞库阶段对MCB 和WCB 进行了内外源病毒因子检测，但有些内源性病毒可能在MCB 和WCB 阶段未被检出，或者在生产过程中引入偶然的病毒因子污染，因而对生产终末细胞和/或细胞收获液中的病毒因子进行检测和控制非常重要。

对于UPB样品，ICH Q5A仅要求在进行上市注册申请时，至少应上报三批试生产或规模化生产的UPB研究资料，一般使用一种或几种细胞系进行体外筛查试验。如适用，可使用PCR试验或其他适当的方法。EMA文件《Guideline on Virus Safety Evaluation of Biotechnological Investigational Products》则指出，每一批用于临床试验的UPB均应按照ICH Q5A的要求进行检测，具体不同细胞系对应的检测方法也有不同。

①如果可能，检测样品应包括细胞或细胞碎片以进行细胞相关病毒检测。对于灌注式细胞培养，生产商应确定并证明最适合的样品（含细胞的样品）收集步骤，收集超出批量生产代次的细胞检测样品也是可行的；在上述情况下，应证明采用分析方法的合理性；如果已有敏感度更高的方法可表明感染逆转录病毒检测结果为阴性，则感染性逆转录病毒的检测可忽略。②仅需在研发的特定阶段对前三批原液进行逆转录病毒或逆转录病毒颗粒的检测（如果制备批次不足三批，也可用更少批次）。

FDA指导文件《Points to Consider in the Manufacture and Testing of Monoclonal Antibody Products for Human Use》中则对UPB、纯化中间品和成品的病毒检测都有不同要求。对于每个批次收获液需要进行外源病毒因子、种属特异性病毒、逆转录病毒或逆转录病毒颗粒定量的检测。

根据中国药典三部（2020版）要求对于人用生物制品生产用动物细胞基质及检定用动物细胞，需要对MCB进行全面检定，并且需要对EOPC进行检定。对于人用重组单克隆抗体制品生产，应根据生产过程及所用材料的特点，在合适的阶段进行常规或特定的外源病毒污染检查。除另有规定外，应对限定细胞传代次数的生产方式，采用适当的体外方法至少对3次收获物进行外源病毒检测。